Сульфосалициловая кислота применяется в аналитической химии как реагент для обнаружения и выделения ионов металлов (Fe, Al, Be, Hg, Ti, Zr, Tl, U), например, ион Fe³⁺ образует моносульфосалицилат розовато-бурого цвета (pH 1,8-2,5), дисульфосалицилат бурого цвета (pH 4-8), трисульфосалицилат жёлтого цвета (pH 8-11). Она также используется как маскирующий реагент для ряда ионов металлов и для определения ионов Fe, U, Be спектрофотометрическим методом. Поскольку сульфосалициловая кислота способна осаждать белки из растворов, то её применяют для их нефелометрического определения (в частности, альбумина в моче).

Сульфосалициловая кислота и её соли имеют антисептическое действие.